GONODOTROPINA CORIONICA HUMANA

HCG EN ORINA

Introducción:

La gonadotropina coriónica humana, más conocida como "la hormona del embarazo". El corion comienza a producir HCG cuando el embrión se implanta en el útero. Por eso la detección de HCG en el organismo de la mujer indica que se ha producido la implantación del embrión.

Material:

Placa
Reactivo para HCG

Aplicador

Orina

Pipetas

Procedimiento 
1.-Se coloca una gota de la muestra (orina) en una de las cavidades de la placa

2.-Se agrega el reactivo a la orina y se mezcla con un aplicador, despues se agita la placa manualmente por 2 minutos.

3.- Observar la muestra y ver si hay aglutinación.
4.- Repetir en caso de que sea positiva para determinar la cantidad de HCG.

Resultado:

Valores de referencia:

SEMANAS DE EMBARAZO RANGO IU/ml. 
3 - 4 semanas 9 - 130 
4 - 5 semanas 75 - 2,600 
5 - 6 semanas 850 - 20,800 
6 - 7 semanas 4,000 - 100,200 
7 - 12 semanas 11,500 - 289,000 
12 -16 semanas 18,300 - 137,000 
16 -29 semanas 1,400 - 53,000 
29 -41 semanas 940 - 60,000

La muestra dio negativa.

Interpretación:

 

IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLECULAS

BIOMOLECULAS

Introducción:

Toda materia viva está compuesta por un grupo reducido de moléculas combinadas entre sí: el agua y las sales minerales, los hidratos de carbono (o carbohidratos), los lípidos, las proteínas, los ácidos nucleicos, las enzimas, las vitaminas y las hormonas.

Algunas de estas moléculas funcionan como parte estructural de las células y los tejidos del cuerpo de los organismos.

Materiales y sustancias:

• 10 tubos de ensaye
• 1 gradilla
• Dos vasos de precipitado
• 1 agitador
• 1 mechero de Bunsen
• 2 pinzas para tubo de ensaye
• 1 gotero
• 1 pliego de papel estraza

Para carbohidratos:

• Reactivo de Fehiling
• Acido clorhídrico al 50%
• Lugol

Para proteínas:

• Reactivo de Biuret
• Acido nítrico concentrado
• Hidróxido de amonio concentrado
• Para lípidos:
• Sudan III

Muestras de alimentos:

• Trigo
• Manzana
• Zanahoria
• Hígado de pollo
• Queso
• Habas

Procedimiento:

Para identificar carbohidratos.

1. Coloque una pequeña cantidad de las muestra en un tubo de ensayo.
2. Agregue 2  gotas de Lugol.
3. Observe el color que toma la muestra al reaccionar con el Lugol.
4. Repita el procedimiento en los demás alimentos.
5. Anote sus observaciones.

 Para identificar lípidos.

1. Coloque pequeñas porciones de cada alimento en pedazos de papel estraza.
2. Doble el papel con el alimento y presione con los dedos.
3. Observa si hay áreas del papel que se vean traslucidas y aparentemente húmedas, lo cual indica que el alimento contiene grasas (prueba positiva).
4. Anote sus observaciones.

Para identificar proteínas con aminoácidos aromáticos.

1. Agregar 1 ml de ácido nítrico  concentrado a una pequeña porción de muestra colocada en un tubo de ensaye, caliente con precaución sujetando el tubo con unas pinzas para tubo de ensaye y metiendo y sacando el tubo de la flama para evitar que se proyecte la solución.
2. Espera a que enfrié.
3. Deja resbalar por las paredes del tubo 1 ml de hidróxido de amonio sin agitar, de tal forma que se formen dos capas.
4. Anote tus observaciones.

 Si en la muestra hay proteínas, se formara un anillo de color naranja entre las dos capas formadas por el ácido nítrico y el hidróxido de amonio.

Resultado:

ALIMENTO	CARBOHIDRATOS	PROTEINAS		LIPIDOS
	LUGOL	BIURET	XANTOPTOTEICA	SUDA III	ESTRAZA
Hígado		ü	ü	ü	ü
Manzana	ü		ü		ü
Zanahoria	ü		ü		ü
Haba	ü	ü	ü		ü
Queso			ü	ü	ü
Trigo	ü		ü		ü

Interpretación:

PRUEBA DE COOMBS

PRUEBA DE COOMBS DIRECTA

Introducción:

El suero de Coombs permite establecer la presencia de globulina y por lo tanto de anticuerpos, ya que son de la misma naturaleza, los anticuerpos incompletos como son los que producen la eritroblastosis fetal y la anemia hemolítica adquirida, se absorben sobre la superficie del glóbulo rojo pero no los aglutinan, el suero Antiglobulina permite reconocer estos glóbulos sensibilizados al combinarse con los anticuerpos globulínicos que ya cubren.

Fundamento:

La prueba directa se realiza cuando el Anticuerpo se ha fijado sobre el eritrocito “in vivo”, permite establecer la sensibilización de los glóbulos rojos que tuvo lugar en el organismo. Se usa para el diagnóstico de eritroblastosis fetal, anemia hemolítica y reacciones hemolíticas postrasfusionales por sangre incompatible.

Material:

• Gradilla
• Tubos de ensaye
• Pipetas Pasteur con bulbo
• Centrifuga 
• Solución salina 
• Suero de coombs

Técnica:

1. Para identificar los glóbulos rojos sensibilizados es necesario remover la totalidad del suero de los eritrocitos, mediante lavadas repetidas con solución salina. 
2. Se prepara una suspensión de glóbulos rojos al 5% de la cuál se colocan dos gotas en un tubo de ensaye y se procede al lavado por tres ocasiones
3. Después del último lavado se resuspenden los glóbulos rojos nuevamente con una gota de solución salina, agregar dos gotas de suero de coombs y mezclar
4. Observar si existe aglutinación en el fondo del tubo con leves movimientos de inclinación.

Interpretación de resultados:

1. La aglutinación en el tubo testigo no debe existir.
2. Si el tubo problema presenta aglutinación, los glóbulos rojos están sensibilizados por algún anticuerpo incompleto.
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   
   

TP Y TPT

DETERMINACION DE TP & TPT 

INTRODUCCIÓN: 

Los factores intrínsecos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro calcio (CaCl₂) hasta la formación de coagulo de fibrina.

El tiempo de protombina (TP) o Tiempo de quick ha servido para determinar trastornos de coagulación, TP es la determinación más frecuente junto con la APTT.

MATERIAL:

• Baño maria
• Tubos de ensaye
• Centrifuga
• Pipeta de 200 microlitros
• Plasma

PROCEDIMIENTO:

1.  Introducir la muestra en la centrifuga a 3500  R.P.M.  durante 5 min. para obtener el plasma sanguíneo.
2. Separar 100 microlitros de plasma con ayuda de la pipeta  y depositar  en un tubo de ensaye. 
3. Seguidamente agregar 200 ML de reactivo de TP y tomar el tiempo con un valor de referencia de 13 segundos.
4. Separar 100 microlitros de plasma con ayuda de la pipeta  y depositar  en un tubo de ensaye.
5. Colocar 100 microlitros de reactivo de TPT en el mismo tubo.
6. Meter el tubo de ensaye a incubar en el baño maría durante 3 minutos
7. Al sacarlo inmediatamente agregar 100 microlitros de cloruro de calcio y medir el tiempo en que se forma el coagulo de fibrina con un valor de referencia de 37 segundos.

FORMA INVERSA Y DIRECTA

PRUEBA DE LA DETERMINACIÓN DE GRUPO SANGUÍNEO DE LA FORMA INVERSA

Introducción: 

El suero del paciente que contiene anticuerpos se pone en contacto con los eritrocitos que contienen antígenos formando un complejo Ag-Ac que se manifiesta microscópicamente mediante una aglutinación.

Material:

• 2 pipetas Pasteur
• 4 tubos de ensaye
• Gradilla 
• Centrifuga 
• Eritrocitos lavados A y B 
• Suero del paciente

Procedimiento:

1. Se preparan suspensiones de glóbulos rojos al 25 de la siguiente forma, en un tubo de ensaye marcado con la letra A se pone una gota de sangre A y en otro marcado con la letra B se pone una gota de sangre B, se llenan los tubos con solución salina se centrifuga a 3000 r.p.m. durante 3 min. y se decanta el liquido sobrenadante invirtiendo los tubos.
2. A cada uno de los tubos se añade 1 cm de solución salina.
3. Se marcan dos tubos de ensaye con la letra A y otro con la B, añadiendo dos gotas de suero.
4. Añadir a cada tubo una gota de suspensión de eritrocitos al 2 % al tubo A suspensión "A" y al tubo B suspensión "B".
5. Centrifugar a 1000 r.p.m. durante 2 min.
6. Sacar los tubos mezclando suavemente e interpretar el resultado.
   
   
   
   

   Interpretación de resultados:

• Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos A significa que tiene Ac B, el suero que tiene Ag A corresponde a la sangre B, el suero problema corresponde a un tipo de sangre del grupo B.
•  Si el suero problema aglutina a los glóbulos rojos B significa que tiene Ac B, el suero que tenga Ag B corresponde a la sangre A, el suero problema corresponde a un tipo de sangre del grupo A.
• Si el suero problema aglutina a  los glóbulos rojos A y B significa que tiene Ac A y B y este corresponde a la sangre O.
• Si el suero problema no aglutina en los globulos rojos A y B, significa que no tiene Ac A ni B, por lo tanto pertnece al grupo AB.