Metodo de Richie

                METODO DE CONCETRACION POR SEDIMENTACION

                                                     PRACTICA 5

Objetivo: Concentrar los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación con ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.

Material:

·         Tubos de ensaye cónicos.

·         Gasas.

·         Embudos.

·         Vasos de precipitado.

·         Aplicadores y abatelenguas de madera.

·         Pipetas Pasteur con bulbo.

Método:

1.       Con el abatelenguas de madera se coloca una pequeña porción de heces en el vaso de precipitado, se le agrega 10 ml. de solución salina y con el agitador se homogeniza la mezcla.

2.       Se filtra la suspensión a través de la gasa colocándola en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.

3.       Se centrifuga la suspensión durante 2 minutos a 2000 r.p.m.

4.       Se decanta el liquido sobrenadante y se resuspende el sedimento con solución salina, centrifugando y resuspendiendo 2 veces más.

5.       Al último sedimento se le agrega 10 ml. de solución de formal de hído al 10%, se mezcla y se deja reposar durante 10 min.

6.       Se añaden despues 5 ml. de éter, se tapan los tubos y se agitan durante 30 seg.

7.       Se centrifuga durante 2 minutos a 2000 r.p.m.

8.       Despues de centrifugar se observan 4 capas:

o    Éter en la superficie.

o    Un tapón de restos fecales.

o    Formal de hído.

o    Sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.

9.       Se decanta el sobrenadante.

10.   Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en el portaobjetos.

11.   Se le añade una gota de yodo lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos se homogeniza, cubriéndole con el mismo.

12.   Se observa la preparación con el objetivo 10x y 40x.

Interpretación:

1.

2.

4.

3.

5.

6.

7.

8.

Resultados:

Comentario: 

Esta práctica me gusto, es como la de Faust pero a diferencia de esta los parásitos se concentran en el fondo del tubo, es sencilla y eficaz para encontrar huevecillos, quistes y trofozoítos.

FAUST - BIS

FAUST - BIS

Practica 4

Objetivo: Visualizar huevos livianos de helmintos (Necator, tricocéfalos, ascaris, H. nana)

Material:

•  3 tubos de ensaye
•  3 portaobjetos
• 3 cubre objetos
• 3 gasas
• 3 embudos
• 3 vasos precipitado
• 1 asa
• 1 mechero
•  3 agitadores
• 3 abatelenguas

Procedimiento:

1. Mezcla la porción de las heces con el abatelenguas, colócala dentro del vaso de precipitado y dilúyela con 10 ml. de agua.
2. Mézclala con el agitador. Coloca la gasa dentro del embudo, este a su vez será sostenido sobre el tubo de ensaye  para colar la disolución.
3. Ya colada se meterá a la centrifuga con un tiempo de 2500 RPM 1'.
4. Se saca de la centrifuga, se vacía el agua (dentro del recipiente donde venia la muestra), quedando solo el sedimento y a este se le agrega 10 ml. de  sulfato de zinc.
5.  Se vuelve a meter en la centrifuga durante 2500 RPM 1’.
6. Se vuelve a sacar de la centrifuga y con el asa (ya esterilizada con fuego) tomaremos porciones para colocarlas en el portaobjetos, el cual debe de contener una gota de yodo. Cada vez que vayamos a colocar una porción de heces, el asa debe de esterilizarse.
7. Colocamos el cubreobjetos encima del portaobjetos.
8. Con el microscopio observaremos si la muestra tiene algo anormal.

Interpretación:

1

2

3

4

5

6

9

7
Despues de decantar
 se centrifuga otras 2 veces

8
Para la tercera centrifugacion
se le echa sulfato de zinc

10
Se rompe el sedimento
antes de centrifugar 

Resultados:

Comentario:
Al parecer en la muestra solo hay grasa y fibras vegetales, no encontramos nada anormal.

Practica 2

COPROPARASITOLOGICO EN FRESCO

Introducción: El exámen en fresco es el más sencillo y el que menos equipo necesita para realizarse. Se recomienda para la búsqueda de trofozoítos de protozoarios móviles, huevos de helmintos y larvas de nematodos. Sin embargo este exámen puede o no revelar parásitos dependiendo de la intensidad de la infección.

Material:

- 2 Muestras fecales diferentes.

-4 Aplicadores de madera.

-4 Porta y 4 cubreobjetos.

-Solución salina isotónica.

-Lugol parasicológico.

Técnica:

1.     En un portaobjetos colocar una gota de solución salina isotónica.

2.     Con la punta del aplicador tomar una pequeña muestra de heces de aproximadamente 1 a 4 mg en muestras con moco y sangre, elegir estas partes para estudiar.

3.     Mezclar, procurando hacer una suspensión en preparación delgada y no frotis.

4.     Quitar de la suspensión fibras y fragmentos grandes.

5.     Colocar el cubreobjetos lentamente procurando no dejar burbujas.

6.     Examinar al microscopio en forma sistemática, a seco débil y a seco fuerte.

7.     Repetir la operación con una gota de lugol en lugar de la solución salina.

8.     Hacer este mismo proceso con ambas muestras de heces.

Interpretación:

Comentario: En esta ocasión si encontramos parásitos, al parecer no patógenos.  

PRACTICA 1 COPROPARASITOLOGICO EN FRESCO

PRACTICA 1

COPROPARASITOLOGICO EN FRESCO

Introducción: El exámen en fresco es el más sencillo y el que menos equipo necesita para realizarse. Se recomienda para la búsqueda de trofozoítos de protozoarios móviles, huevos de helmintos y larvas de nematodos. Sin embargo este exámen puede o no revelar parásitos dependiendo de la intensidad de la infección.

Material:

- 2 Muestras fecales diferentes.

-4 Aplicadores de madera.

-4 Porta y 4 cubreobjetos.

-Solución salina isotónica.

-Lugol parasicológico.

Técnica:

1.     En un portaobjetos colocar una gota de solución salina isotónica.

2.     Con la punta del aplicador tomar una pequeña muestra de heces de aproximadamente 1 a 4 mg en muestras con moco y sangre, elegir estas partes para estudiar.

3.     Mezclar, procurando hacer una suspensión en preparación delgada y no frotis.

4.     Quitar de la suspensión fibras y fragmentos grandes.

5.     Colocar el cubreobjetos lentamente procurando no dejar burbujas.

6.     Examinar al microscopio en forma sistemática, a seco débil y a seco fuerte.

7.     Repetir la operación con una gota de lugol en lugar de la solución salina.

8.     Hacer este mismo proceso con ambas muestras de heces.

 Interpretación:

1

2

3

4

5

6

 Comentario: Me gusto la practica porque es sencilla aunque no nos salió a la primera porque nos quedaban burbujas al colocar el cubre y no encontramos ningún parásito.  

PRACTICA 8

Hematocrito

Introducción: El hematocrito es el volumen de eritrocitos en una muestra sanguínea y se expresa en porcentaje, es un metodo sencillo y confiable para detectar anemia o policitemia.

Material:

• 1 tubo wintrobe
• 1 tubo capilar
• Plastilina o fuego
• Centrifuga
• Microcentrifuga
• Pipeta Pasteur de tallo largo
• Equipo para venopunción 
• Lector para hematocrito o regla.

Técnica (macrometodo)

1. Se mezcla la muestra sanguínea suavemente y con una pipeta Pasteur se llena el tubo wintrobe, colocando la punta de la pipeta hasta el fondo del tubo, la punta de la pipeta se va elevando pero permaneciendo debajo del mecanismo de sangre para evitar la formación de burbujas o espuma.
2. El tubo se llena hasta la marca 100 con la muestra sanguinea y se pone a centrigugar durante 30 minutos a 3000 r.p.m.
3. Se efectúa la lectura.

Técnica (micrometodo)

1. Mezclar la muestra sanguínea y llenar el tubo capilar hasta 3/4 partes.
2. el extremo vació que no estuvo en contacto con la sangre se sella con plastilina o calor hasta  que la sangre ya no se mueva.
3. el tubo con la muestra sanguínea se coloca en la microcentrifuga a 10000 r.p.m. durante 10 minutos.
4. Se lee el porcentaje de hematocrito en el lector o se mide con una regla.

Interpretación: