Metodo de Richie

                METODO DE CONCETRACION POR SEDIMENTACION

                                                     PRACTICA 5

Objetivo: Concentrar los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación con ayuda de formol y éter para separar y visualizar los elementos parasitarios.

Material:

·         Tubos de ensaye cónicos.

·         Gasas.

·         Embudos.

·         Vasos de precipitado.

·         Aplicadores y abatelenguas de madera.

·         Pipetas Pasteur con bulbo.

Método:

1.       Con el abatelenguas de madera se coloca una pequeña porción de heces en el vaso de precipitado, se le agrega 10 ml. de solución salina y con el agitador se homogeniza la mezcla.

2.       Se filtra la suspensión a través de la gasa colocándola en el embudo, recogiendo el filtrado en el tubo cónico.

3.       Se centrifuga la suspensión durante 2 minutos a 2000 r.p.m.

4.       Se decanta el liquido sobrenadante y se resuspende el sedimento con solución salina, centrifugando y resuspendiendo 2 veces más.

5.       Al último sedimento se le agrega 10 ml. de solución de formal de hído al 10%, se mezcla y se deja reposar durante 10 min.

6.       Se añaden despues 5 ml. de éter, se tapan los tubos y se agitan durante 30 seg.

7.       Se centrifuga durante 2 minutos a 2000 r.p.m.

8.       Despues de centrifugar se observan 4 capas:

o    Éter en la superficie.

o    Un tapón de restos fecales.

o    Formal de hído.

o    Sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.

9.       Se decanta el sobrenadante.

10.   Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en el portaobjetos.

11.   Se le añade una gota de yodo lugol y con uno de los ángulos del cubreobjetos se homogeniza, cubriéndole con el mismo.

12.   Se observa la preparación con el objetivo 10x y 40x.

Interpretación:

1.

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4.

3.

5.

6.

7.

8.

Resultados:

Comentario: 

Esta práctica me gusto, es como la de Faust pero a diferencia de esta los parásitos se concentran en el fondo del tubo, es sencilla y eficaz para encontrar huevecillos, quistes y trofozoítos.