Recuento

DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

Introducción: 

Consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en un frotis teñido en sangre.

Al conocer la proporción de las células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíneo cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyetico podría verse reflejado en un cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento celular diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.

Material y reactivos:   

• Frotis sanguíneo teñido
• Microscopio
• Aceite de inmersión
• Liquido de wright
• Buffer
• Cuba
• Agua corriente

Tinción de wright.

1. Colocar el frotis secado al aire sobre una cuba de tinción con la sangre hacia arriba. 
2. Cubrir completamente el portaobjetos de Wright. 
3. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, para fijar los glóbulos sanguíneos. El colorante deberá cubrir completamente el portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deberá agregarse una cantidad adicional si éste se comienza a evaporar. 
4.  Agregar directamente al colorante un volumen igual de buffer, para evitar la coloración débil. Esperar la formación de brillo metálico. Dejar actuar de 10-15 minutos. 
5.  Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un aspecto rosado al examinarlo a simple vista. 
6.  Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa para eliminar cualquier resto de colorante. 
7. Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión.

Procedimiento.

1. Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.
2. Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100x.
3. Si el recuento se hace linea se empieza en un borde del frotis hasta el otro borde en linea paralela hasta contar 100 leucocitos.
4. Se van contando los mononucleares (monocitos y eosinofilos) y los polimorfo nucleares (neutrofilos, eosinofilos y basofilos) según su morfología.
5. Se reportan en % (valor) o en valor absoluto (mm³).

Valores de referencia:

                                     Adultos                                         Niños

Linfocitos                     20-55%                                        20-50%

Monocitos                       2-6%                                            0-9%

Eosinofilos                       1-5%                                            0-8%

Basofilos                          0-1%                                            0-1%

Neutrofilos                   45-70%                                        20-60%

Bandas                            0-5%                                             1-6%

Resultados:

Manuel.

Linfocitos                     35%                                       

Monocitos                      3%                                            

Eosinofilos                      7%                                            

Basofilos                         0%                                            

Neutrofilos                    56%                                        

Bandas                            0%

Omar.

Linfocitos                     39%                                       

Monocitos                      3%                                            

Eosinofilos                      1%                                            

Basofilos                         0%                                            

Neutrofilos                    57%                                        

Bandas                            0%

Conclusión:

Es una practica muy sencilla, fácil de realizar, quizá cueste trabajo aprender a localizar  a cada leucocito pero debido a sus características únicas es mas fácil identificarlos y si se tiene un buen frotis se verán mejor.