Determinación de aglutinogenos

GRUPO SANGUINEO

Objetivo:

El alumno determinara el grupo sanguíneo y el factor Rh de una muestra sanguínea utilizando los antisueros correspondientes y previa demostración correctamente.

Introducción:

Los grupos sanguíneos se han clasificado así por poseer características diferentes, estas características son los antígenos (aglutinogenos) y los anticuerpos (aglutininas) que son los responsables de las reacciones adversas inmunológicas en las transfusiones.

Material: 

• Equipo de venopunción.
• Placa de vidrio excavada. 
• Aplicadores de madera.
• Lanceta estéril.
• 4 Tubos de ensaye (por muestra de sangre).
• Gradilla.
• Centrifuga.

Reactivos:

• Anti-suero A
• Anti-suero B
• Anti-suero D
• Solución isotónica de NaCl al 0.9%

Método en placa excavada:

1. Se utiliza punción cutánea con la lanceta, se deshecha la primera gota y se deposita una gota en cada una de las excavaciones en forma horizontal o se marcan las letras A, B y Rh, y posteriormente se añade una gota de suero en donde le corresponda.
2. Mezclar perfectamente con un aplicador diferente cada una de las preparaciones.
3. Leer el resultado.

Método en tubo de ensaye:

1. Se utiliza la punción venosa, se deposita 2 ml de sangre en un tubo de ensaye con 9.8 ml de solución isotónica de NaCl al 0.9%, para formar una suspensión de eritrocitos al 2%.
2.  Marcar 3 tubos de ensaye con las letras A,B y Rh y depositar el suero que le corresponde.
3. Añadir a los tubos una suspensión de eritrocitos al 2%.
4. Centrifugar a 1000 r.p.m. durante 1 minuto.
5. Sacar los tubos e inmediatamente ver si existe aglutinación.

Interpretación de los resultados:

Resultados:

Método en Placa excavada. "A" Rh Positivo.

Método en Tubo. "A" Rh Positivo.

Conclusión:

Esta practica debe llevarse a cabo con responsabilidad ya que si al dar los resultados del grupo sanguíneo de una persona, no son los correctos y se realizara una transfusión de sangre podría morir por no insertarle la sangre que le corresponde, de ahi en fuera es una practica muy sencilla.

Recuento

DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

Introducción: 

Consiste en reconocer y valorar las proporciones relativas de las distintas variedades de glóbulos blancos que se observan en un frotis teñido en sangre.

Al conocer la proporción de las células sanguíneas que están presentes en el torrente sanguíneo cualquier trastorno patológico que altere el sistema hematopoyetico podría verse reflejado en un cambio de la proporción de una especie celular. Para el recuento celular diferencial se tiene que observar un mínimo de 100 leucocitos.

Material y reactivos:   

• Frotis sanguíneo teñido
• Microscopio
• Aceite de inmersión
• Liquido de wright
• Buffer
• Cuba
• Agua corriente

Tinción de wright.

1. Colocar el frotis secado al aire sobre una cuba de tinción con la sangre hacia arriba. 
2. Cubrir completamente el portaobjetos de Wright. 
3. Dejarlo que permanezca en el frotis aproximadamente de 5-8 minutos, para fijar los glóbulos sanguíneos. El colorante deberá cubrir completamente el portaobjetos, pero no debe derramarse por los bordes. Deberá agregarse una cantidad adicional si éste se comienza a evaporar. 
4.  Agregar directamente al colorante un volumen igual de buffer, para evitar la coloración débil. Esperar la formación de brillo metálico. Dejar actuar de 10-15 minutos. 
5.  Lavar con agua en el chorro cuidadosamente hasta que la extensión presente un aspecto rosado al examinarlo a simple vista. 
6.  Limpiar el dorso del portaobjetos con una gasa para eliminar cualquier resto de colorante. 
7. Secar al aire y observar con el microscopio con el objetivo de inmersión.

Procedimiento.

1. Se coloca el frotis en el microscopio y se enfoca.
2. Se le agrega una gota de aceite de inmersión y se observa con el objetivo de 100x.
3. Si el recuento se hace linea se empieza en un borde del frotis hasta el otro borde en linea paralela hasta contar 100 leucocitos.
4. Se van contando los mononucleares (monocitos y eosinofilos) y los polimorfo nucleares (neutrofilos, eosinofilos y basofilos) según su morfología.
5. Se reportan en % (valor) o en valor absoluto (mm³).

Valores de referencia:

                                     Adultos                                         Niños

Linfocitos                     20-55%                                        20-50%

Monocitos                       2-6%                                            0-9%

Eosinofilos                       1-5%                                            0-8%

Basofilos                          0-1%                                            0-1%

Neutrofilos                   45-70%                                        20-60%

Bandas                            0-5%                                             1-6%

Resultados:

Manuel.

Linfocitos                     35%                                       

Monocitos                      3%                                            

Eosinofilos                      7%                                            

Basofilos                         0%                                            

Neutrofilos                    56%                                        

Bandas                            0%

Omar.

Linfocitos                     39%                                       

Monocitos                      3%                                            

Eosinofilos                      1%                                            

Basofilos                         0%                                            

Neutrofilos                    57%                                        

Bandas                            0%

Conclusión:

Es una practica muy sencilla, fácil de realizar, quizá cueste trabajo aprender a localizar  a cada leucocito pero debido a sus características únicas es mas fácil identificarlos y si se tiene un buen frotis se verán mejor.